Crecimiento, supervivencia y respuesta inmune de la almeja catarina (Argopecten ventricosus) tratada con productos naturales y retada con Vibrio parahaemolyticus

Abstract

La almeja Catarina Argopecten ventricosus constituye un importante recurso pesquero en México, principalmente en el Golfo de California, pero debido a la sobrepesca se colapsaron las poblaciones naturales de esta especie, además se sabe que la incidencia de enfermedades provoca mortalidades masivas en los cultivos. Debido a esto, se han realizado esfuerzos para desarrollar el cultivo con fines comerciales y de repoblamiento. Por lo tanto se determinó la supervivencia, crecimiento y respuesta inmune de semillas y adultos de Argopecten ventricosus tratados con aditivos naturales y retados con Vibrio parahaemolyticus. La susceptibilidad y la concentración letal media de V. parahaemolyticus se evaluaron en semillas y adultos desafiados por inmersión, es decir, se inoculó la bacteria patógena en el agua de cultivo. El análisis histológico se realizó en adultos desafiados por inmersión. El crecimiento fue evaluado en semillas de A. ventricosus, adicionando en el agua una mezcla de probióticos aislados de almeja catarina (MPAC), inulina y ácido fúlvico. Organismos adultos se inyectaron en el músculo aductor con Vibrio parahaemolyticus inactivado por calor para analizar la respuesta inmune a nivel bioquímico (conteo de hemocitos, fenoloxidasa y enzimas lisosomales) y molecular (transcriptoma). Se secuenció una librería de ADNc obtenida de un pool de ARN de gónada, músculo, hepatopáncreas, branquias y hemocitos en la plataforma Illumina NextSeq 2 x 75 ciclos de organismos infectados. Las semillas y adultos fueron susceptibles a V. parahaemolyticus mostrando una CL50 de 623 UFC/mL y 62,853 UFC/mL, respectivamente. Las toxinas de V. parahaemolyticus causaron daños en las glándulas digestivas de los adultos. Se observaron variaciones significativas en el número y área de hemocitos, actividad de la fenoloxidasa y enzimas hidrolíticas lisosomales, principalmente a las 8 y 24 h después de la infección. Los aditivos naturales mejoran el crecimiento de A. ventricosus y le confieren mayor resistencia ante infecciones causadas por V. parahaemolyticus. Los aditivos mejoraron significativamente el crecimiento en peso, longitud, altura y ancho de las semillas y la supervivencia ante el reto con el vibrio. Las semillas son más susceptibles a la infección por el Vibrio que los adultos. La respuesta inmune de A. ventricosus, a nivel bioquímico, fue modulada por V. parahaemolyticus. Se ensamblaron 82,468 contigs, 31,120 se anotaron contra la base de datos de proteínas del NCBI-nr. Se obtuvieron 491 genes relacionados con el sistema inmune. Se encontraron transcritos de receptores de reconocimiento de patrones moleculares (RRPMs), rutas de señalización inmune, efectores inmunes y de apoptosis. La mezcla de bacilos en el agua de cultivo de A. ventricosus aumentó significativamente la expresión de los genes HSP70, PEL y qPUP. A. ventricosus es muy susceptible a V. parahaemolyticus pero los aditivos naturales mejoran el crecimiento y su resistencia ante la infección. El V. parahaemolyticus modula la respuesta inmune a nivel bioquímico. A nivel genético, este es el primer reporte sobre transcritos de genes involucrados en la respuesta inmune de A. ventricosus que permiten dilucidar la complejidad de su sistema inmune innato, el cual le permite adaptarse a la vida en un ambiente acuático rico en patógenos potenciales.